VHH-CAR-T-T buňky zaměřené na Nectin4 vykazují účinnost proti rakovině močového měchýře

Oznámení nové publikace pro článek pro Bio Integrace časopis. Rakovina močového měchýře (BLCA) je jedním z nejčastějších malignit a druhý nejčastější urogenitální nádor. Buněčná a genová terapie, která nabízí mnoho výhod při léčbě BLCA, je naléhavě nutná. Důležité omezení aktuálně hlášené jednohoředové protilátky používané jako chimérické antigenové receptor (CAR) zaměřující doménu. Konkrétně agregace CAR vede k vyčerpání CAR-T, což může pocházet z peptidu linkeru a stability skládání mezi proměnlivými doménami (VH a VL) jednohoředinové protilátky automobilu. Humanizované, malé velikosti a silné afinitní protilátky s jednou doménou (variabilní doména těžkého řetězce protilátky s těžkým řetězcem (VHH)) odvozené z camelidů jsou slibné alternativy.

VHH-CAR-CAR-CAR-CAR-CAR-T buňky byly postaveny a konkrétní zabíjení účinnost byl stanoven proti BLCA buňkám in vitro. Lentivirus VHH Nectin4-Car byl transdukován do lidských T buněk a fenotypy CAR-T buněk byly analyzovány průtokovou cytometrií. Účinnost zabíjení buněk byla hodnocena pomocí nectin4-pozitivních BLCA buněk (SW780 a RT4) a nectin4-negativních buněk U87-mg jako kontrol pomocí systému analýzy buněk v reálném čase xcelligence. Exprese sekrece cytokinů (IFN-y a IL-2) byla měřena enzymově vázaným imunosorbentem.

Vhh^Nectin4-Cars Lentivirus ošetření zvýšilo podíl CD4+ T a paměťových T buněk. Vhh^Nectin4-Ar-T-T buňky měly zvýšenou specifickou schopnost zabíjení ve srovnání s kontrolou pomocí CAR-T buněk na bázi VH-VL, konkrétně rozpoznávané nektin4⁺ Buňky BLCA, sekretované cytokiny a zprostředkovaná buněčná apoptóza. Kromě toho VHH^Nectin4-Car-T neměl žádný účinek na nectin4^– Růst buněk U87-mg.
Vhh^Nectin4-Car-T buňky byly stanoveny se silnou schopností zabíjení, které konkrétně rozpoznaly nektin4⁺ BLCA buňky in vitro.